Protocole d'extraction et de préparation de l'échantillon de cerveau murin

Projet final en GBM – P5OCT (Hiver 2022)

Désinfecter la surface de travail avec du papier brun et le désinfectant de surface.
Former de 5 à 6 sphères de gommette d’environ 0,5 cm de diamètre avec les doigts.
Dans un bécher de 50 mL, remplir environ 30 mL d’eau distillée.
Visser l’aiguille plate 14G sur la seringue en plastique.
Remplir 5 à 10 mL d’eau distillée dans la seringue.
Aligner l’aiguille 14G et le microcapillaire.
En positionnant le microcapillaire à l’horizontal, remplir ce dernier d’eau avec la seringue et bloquer une extrémité avec son doigt.
À l’extrémité libre, insérer les sphères de gommette préparées à l’étape 2 jusqu’à obtenir un bouchon d’environ 1 cm de longueur à l’intérieur du capillaire pour sceller le bout du capillaire (Il peut être souhaitable de retirer un gant ici car la gommette colle au gant).
Avec les pinces ESD-12, enfoncer le bouchon de gommette pour que le ménisque de l’eau soit bien à l’extrémité opposée du bouchon de gommette du microcapillaire.

Désinfecter la surface de travail.
À l’aide des pinces plates, saisir doucement la tranche de cerveau murin et déposer sur le bécher de 250 mL à l’envers.
Prélever l’échantillon dans la zone déterminée au préalable par l’expérimentateur à l’aide du punch à biopsie de 1 mm.
Soulever le cerveau à l’aide des pinces plates pour s’assurer que l’échantillon est bien en place dans le punch à biopsie.
Insérer délicatement l’échantillon dans l’extrémité ouverte du microcapillaire, en s’assurant de ne pas y insérer de bulles d’air.
Avec le dos de l’aiguille à couture, pousser l’échantillon jusqu’au milieu du microcapillaire pour le préparer pour le système mécanique.